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    ClonePix 2 细胞克隆筛选系统

    ClonePix 2 哺乳动物细胞克隆筛选系统是一个全自动化系统,可在抗体开发细胞系开发中用更短的时间筛选更多优质克隆。可进行杂交瘤细胞筛选,单克隆抗体发现,细胞表面表达筛选,其他蛋白表达筛选,克隆产量筛选和滴度及稳定高表达细胞株筛选等等应用。

    该系统可对杂交瘤细胞、中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、干细胞以及其他多种细胞类型进行成像,并根据用户定义的参数在前期就进行特异性筛选。ClonePix 2 能够全流程自动化运行,包括孔板传送、条形码读取、细胞成像、挑选操作、管路清洁、环境灭菌等,并保存所有数据(包括图像)用于下游分析。该筛选系统增加了找到稀有优质细胞株的概率并显著节省了时间和人力。


    将成像、筛选、挑取等流程浓缩为一个整体解决方案

    自动化流程,筛选出的克隆数量比有限稀释法多10倍

    根据产率、表达水平、抗原特异性等筛选理想特性的细胞

    提高发现优质克隆的概率,在早期消除或恢复不稳定的克隆

    特点
     
    参数
    属性
    参数
    源板类型
    Petri 6 孔板、Petri 1 孔板、Greiner 6 孔板、Nunc 6 孔板、Nunc OmniTray
    终板类型
    Petri 96 孔板、Costar 96 孔板、Greiner 96 孔板、Nunc 96 孔板、Falcon 96 孔板
    源板通量
    10 块
    终板通量
    10 块
    挑头
    8 根挑针 - 每根针单独控制
    挑针尺寸
    挑针的直径专用于应用 - F1:悬浮细胞;F2:贴壁细胞
    挑取速度
    > 200 个克隆/小时
    洗槽
    乙醇洗槽(自动加注)
    挑取系统液体
    5 升无菌水用品, 5 升废弃瓶
    挑针干燥
    卤素灯干燥站
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    应用

    ●杂交瘤细胞筛选

     抗体开发通常是指筛选和识别能靶向特定表位以实现疾病诊治的单克隆抗体(mAb)。产生单克隆抗体的一种常用方法是将有丝分裂前的癌症细胞与脾脏中有丝分裂后的表达终端抗体的B细胞融合。产生的融合细胞称为杂交瘤细胞,它拥有产生单克隆抗体的优势,同时还可分裂再生。使用ClonePix 2系统可自动筛选杂交瘤细胞的结合特异性或产率。


    ●单克隆抗体发现

     抗体开发通常是指筛选和识别能靶向抗原分子以实现疾病诊治的特异性抗体。抗体的特异性取决于其结合表位(抗原分子上的独特区域)的能力。治疗性抗体通常为单细胞源性单克隆抗体,可靶向抗原上的独特表位区域。ClonePix 2系统可从异源细胞群中自动筛选和快速检测抗原特异性克隆。


    ●细胞表面表达筛选

    许多在细胞表面表达的蛋白都是用于发现和开发生物医药的靶标。例如,G蛋白偶联受体(GPCR)是最大的一类细胞表面蛋白,并且是大约40%现有药物的靶标。从转染后的细胞池中发现和挑选细胞表面GPCR表达增加的高价值克隆可能极具挑战性。ClonePix 2系统是可筛选大量细胞的一种自动化方法,它增加了发现稀有高亲和力杂交瘤细胞或高产细胞的概率。


    ●其他蛋白表达筛选
    除了抗体、GPCR外,ClonePix系统还可以用于筛选表达其他蛋白质的高价值细胞,如重组蛋白质(带标签或不带标签)和细胞膜蛋白。利用荧光标记的目的蛋白特异性抗体,结合成像分析和自动化挑取,ClonePix系统能够显著提升高表达细胞系的筛选效率。

    ●克隆产量筛选和滴度

     识别优质克隆的一个重要步骤是测定单细胞来源克隆的表达量。使用传统方法筛选产率费力且耗时,通常包含多个步骤,涉及从有限稀释中分离单细胞之后再用ELISA进行滴度评估。


    ●稳定高表达细胞株筛选
    细胞株开发是制备生物制药分子(如单克隆抗体)过程中的关键步骤。该过程通常从将编码目标蛋白的DNA转染至宿主细胞开始,目标 DNA 会随机或定向整合至宿主细胞基因组中。筛选数以千计的克隆以鉴别稀有的高产细胞是一个手动且耗时的过程。基于ClonePix 2的短筛选周期可以获得更多目标克隆以开发更优细胞株。

    发表文献:
    Ahmed Muhsin, Roberto Rangel, et al. Monoclonal Antibodies Generation: Updates and Protocols on Hybridoma Technology. MIMB 2345, 73–93 (2022).
    Gargi Roy, Guillermo Miro-Quesada, et al. Sequential screening by ClonePix FL and intracellular staining facilitate isolation of high producer cell lines for monoclonal antibody manufacturing. Journal of Immunological Methods 451, 100-110 (2017).
    Darren J. Schofield, Jennifer Percival-Alwyn, et al. Activity of murine surrogate antibodies for durvalumab and tremelimumab lacking effector function and the ability to deplete regulatory T cells in mouse models of cancer. mAbs 13, (2021).
    Shuuichi Miyakawa, Toshitake Okui, et al. Development of novel highly sensitive methods to detect endogenous cGAMP in cells and tissue. Journal of Immunological Methods 480, (2020).
    Alexandre Kuhn, Valérie Le Fourn, et al. Genome-wide analysis of single nucleotide variants allows for robust and accurate assessment of clonal derivation in cell lines used to produce biologics. Biotechnology & Bioengineering 117, 3628-3638 (2020) .
    Beatrice Cameron,Tarik Dabdoubi, et al. Complementary epitopes and favorable developability of monoclonal anti-LAMP1 antibodies generated using two transgenic animal platforms. PLOS ONE 15, (2020).
    Lucille Pourcel, Flavien Buron, ET AL. Transient vitamin B5 starving improves mammalian cell homeostasis and protein production. Metabolic Engineering 60, 77-86 (2020).
    Heena Dhiman, Marguerite Campbell, ET AL. Predicting favorable landing pads for targeted integrations in Chinese hamster ovary cell lines by learning stability characteristics from random transgene integrations. Computational and Structural Biotechnology Journal 18, 3632-3648 (2020).
    Alan Tin Lun Lam, Valerie Ho, ET AL. An allied reprogramming, selection, expansion and differentiation platform for creating hiPSC on microcarriers. Cell Proliferation 55, (2022).
    Kevin J. Paavola, Julie M. Roda, et al. The Fibronectin–ILT3 Interaction Functions as a Stromal Checkpoint that Suppresses Myeloid Cells. Cancer Immunol Res 9, 1283-1297 (2022).
     
     
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